抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式,主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的OMEGA57杀菌防霉剂品种。

试验方法:
     准备的用具:霉菌培养皿,无菌吸管(或针筒),圆片滤纸(直径2cm),带玻璃珠的无菌水,带过滤漏斗的三角牌,镊子,接种针(环),熔化状态的琼脂培养基(最好保温于45℃左右水浴中),一定浓度的药剂,供试验用的菌种。

1、用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中,用手振荡数分钟使孢子分散,过滤后制成混合孢子悬液。
2、用无菌吸管(或针筒)向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。
3、向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基(约45℃),将菌液与培养基混合均匀,待其冷却。
4、用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻,取出置于带菌培养基平板的中央,盖上盖子
5、置适宜温度下,培养2~3d,观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。

注意事项:

1、所有的操作用具要做灭菌处理,操作必须在无菌室(或无菌箱)内于火焰旁进行。
2、霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液,即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液,并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。
3、混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL.
4、倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高(一般为45℃左右),否则会引起微生物死亡。也不能太低,因为琼脂会很快凝结,以致搅拌不均匀,影响试验结果。
5、各种微生物的最适生长温度不同(例如霉菌一般为25~30℃,细菌一般为32~37℃等),恒温培养时宜分开放置。

试验结果:
    由于滤纸圆片所吸附的药液慢慢向四周扩散,因此在滤纸片的周围就出现清晰的抑菌圈(加入该防霉剂对供试菌有抑制效果)。抑菌圈的大小代表药剂抗菌力的高低。在一定的药剂浓度范围内,药剂的浓度越高则抑菌圈的直径越大。此法同样适合于测定单个菌的抗菌效果。


 

 

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